Utilisé par les grandes sociétés pharmaceutiques pour révéler les complexités de la biologie cellulaire dans des écrans à haut contenu
Les cellules peuvent révéler beaucoup de choses sur les performances des nouveaux composés médicamenteux, mais les tests in vitro existants donnent une vision très limitée et simplifiée de la biologie cellulaire. Heureusement, avec ChromaLive, les scientifiques peuvent désormais capturer les précieuses informations contenues dans les cellules.
Semblable au séquençage de l’ARN, ChromaLive génère une signature unique pour des centaines d’états cellulaires, permettant aux scientifiques de mieux comprendre le mécanisme des médicaments à des échelles à haut débit.
Fonctionnalités de ChromaLive
Non toxique
Modèles d’expression génétique non affectés et stables dans les cultures de cellules vivantes de plusieurs semaines.
Mélanger et lire
Colorant en une seule étape, sans lavage, qui ne fluoresce pas dans le milieu. Reste dans le milieu tout au long de l'essai.
Évaluer un large éventail de biologie
ChromaLive fournit à lui seul des informations biologiques de haute densité et permet donc de quantifier divers mécanismes de mort cellulaire ou de générer des empreintes phénotypiques uniques de médicaments.
Applications
Questions fréquemment posées
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Les données de séquençage d'ARN et les cultures cellulaires d'une semaine étayent cette affirmation. La figure 2 de cet article de SLAS Discovery présente des données de séquençage d'ARN et de protéomique à l'appui montrant des profils d'expression non perturbés - contrairement aux colorants alternatifs pour cellules vivantes - pour les cellules cultivées en présence de ChromaLive.
De plus, ChromaLive a été testé avec succès dans des systèmes cellulaires sensibles sans affecter la santé cellulaire pendant des semaines. Par exemple, il a été utilisé dans une culture de 3 semaines de neurones dérivés d'iPSC et dans une culture de 6 semaines d'organoïdes de cancer de la prostate dérivés de patients.
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Les données de séquençage d'ARN et les cultures cellulaires d'une semaine étayent cette affirmation. La figure 2 de cet article de SLAS Discovery présente des données de séquençage d'ARN et de protéomique à l'appui montrant des profils d'expression non perturbés - contrairement aux colorants alternatifs pour cellules vivantes - pour les cellules cultivées en présence de ChromaLive.
De plus, ChromaLive a été testé avec succès dans des systèmes cellulaires sensibles sans affecter la santé cellulaire pendant des semaines. Par exemple, il a été utilisé dans une culture de 3 semaines de neurones dérivés d'iPSC et dans une culture de 6 semaines d'organoïdes de cancer de la prostate dérivés de patients. -
ChromaLive est un produit qui est un colorant à petites molécules multichromatiques qui est excité à deux longueurs d'onde différentes : 488 nm, avec une émission à décalage de stokes longs dans le rouge (le rendant compatible avec votre propre fluorophore GFP) et 561 nm qui a une émission jaune standard.
Consultez notre document « Comment fonctionne ChromaLive » dans nos ressources pour plus de détails, notamment pourquoi il colore à la fois le cytoplasme cellulaire et les mitochoindres : https://www.saguarobio.com/resources/
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Le signal de fluorescence de ChromaLive peut être conservé ou supprimé après la fixation, en fonction de vos besoins d'analyse en aval. La rétention du signal nécessite notre additif ChromaLive Fix et est réalisée avec 4 % de PFA. En fixant et en perméabilisant les cellules (sans additif ChromaLive Fix), le signal peut être entièrement supprimé.
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ChromaLive est multichromatique et est donc excité à deux longueurs d'onde : 488 nm et 561 nm. Le canal 488 a une émission à décalage de stokes longs dans le rouge (ce qui le rend compatible avec votre propre fluorophore GFP), tandis que le canal 561 a une émission jaune standard. La plupart des instruments d'imagerie à haut contenu sont compatibles avec ChromaLive. Consultez nos ressources sur notre site Web pour trouver une liste d'instruments compatibles, ainsi que des notes techniques détaillant la sélection de filtres spécifiques aux systèmes Yokogawa, Molecular Devices et Revvity. Les systèmes Incucyte sont également compatibles avec ChromaLive !
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ChromaLive est disponible en tubes de 10 µL et s'utilise à une dilution de 1:1 000 dans le milieu de culture. L'inertie biologique de ChromaLive et sa fluorescence uniquement lors de son incorporation dans les cellules permettent son ajout au stade de l'ensemencement cellulaire, ce qui est fortement recommandé. L'ajout de ChromaLive à un stade ultérieur est possible, mais il est recommandé de tester la cinétique de coloration car une coloration optimale peut prendre jusqu'à 12 heures selon le type de cellule.
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